在干凈的玻片上,將固體培養(yǎng)基上生長的細菌按照以下方法制作涂片:
(1) 用蠟筆將玻片分成幾部分,每部分涂一個菌。
(2) 每部分用接種環(huán)加少量的無菌水。
(3) 垂直拿住接種環(huán)在酒精燈外焰上加熱直到整個接種絲燒紅。
(4) 等待接種環(huán)冷卻。
(5) 像拿筆一樣握住接種環(huán),沾取少量菌株,注意避免沾到瓊脂,
(6) 將菌株轉(zhuǎn)移到玻片的水滴上,用接種環(huán)平面乳化后將其在劃分的區(qū)域內(nèi)涂抹均 勻。注意要涂抹得又薄又勻,但也要避免涂抹得太薄以至于干燥后無法觀察。單個菌落 在顯微鏡下容易觀察。如果菌株沒冇均勻的涂抹開,而是聚在一起,應該棄置,重新涂片。
(7)將接種環(huán)滅菌。
(8)用同樣的方式制備其他涂片。
(9)玻片在空氣中晾干,在酒精燈火焰上快速過兩次使細胞凝結(jié)并牢固地固定在玻片上
涂抹液體培養(yǎng)基中的細菌涂片應采用同樣的方法,只是不需要準備稀釋液。培養(yǎng)基 中成分和雜質(zhì)的存在會造成涂片不干凈。如果液體培養(yǎng)基中含糖量較髙(如乳酸菌培養(yǎng) 基),在固定玻片時要適當延長加熱時間,避免在沖冼玻片時因糖的溶解而將細菌沖洗掉。