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• 產(chǎn)品描述： EPZ004777是一種有效的，選擇性的DOT1L抑制劑，無(wú)細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為0.4 nM

• 靶點(diǎn)： DOT1L(Cell-free assay):0.4 nM;Apoptosis;?HistoneMethyltransferase

• 體外研究：
  EPZ004777選擇性抑制細(xì)胞H3K79甲基化，并抑制關(guān)鍵MLL融合靶基因的表達(dá)。DOT1L受抑制后，EPZ004777選擇性抑制MLL基因重排的細(xì)胞系和MLL-AF9轉(zhuǎn)化的小鼠造血細(xì)胞增殖。此外, EPZ004777作用于MLL基因重排的細(xì)胞系，也誘導(dǎo)分化和凋亡。EPZ004777選擇性抑制MLL-AF10和CALM-AF10轉(zhuǎn)化的小鼠造血細(xì)胞增殖。EPZ004777 抑制DOT1L后，顯著降低增殖，降低MLL-AF6靶基因表達(dá)，和MLL-AF6轉(zhuǎn)化的小鼠造血細(xì)胞的細(xì)胞周期停滯

• 體內(nèi)研究：
  EPZ004777處理MLL白血病小鼠移植瘤模型，產(chǎn)生有效的抗腫瘤功效，且顯著提高平均壽命

• 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)： Cell lines: 人類白血病細(xì)胞系 MV4-11, THP-1, RS4;11, Kasumi-1, HL-60, REH, 和 Jurkat. SEM, KOPN-8, 697, U937 和 MOLM-13 細(xì)胞 Concentrations: ~50 μM Incubation Time: 14-18 天 Method: 測(cè)評(píng)人類細(xì)胞系增殖和活力，呈指數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)胞接種按一式三份接種在96孔板中，終體積為150 ml。在3 μM (增殖曲線), 或濃度不斷增加(測(cè)定IC50) EPZ004777（高達(dá)50 μM）時(shí)，進(jìn)行細(xì)胞溫育。每隔3-4天，通過(guò)Guava Viacount實(shí)驗(yàn)測(cè)定活存細(xì)胞，最多至18天，然后使用Guava EasyCyte Plus 儀器分析。進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，更換生長(zhǎng)培養(yǎng)基和EPZ004777，細(xì)胞分裂回每孔5×104?？偧?xì)胞數(shù)表現(xiàn)為每孔分裂調(diào)整后的活細(xì)胞。根據(jù)濃度依賴性曲線每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，使用Graphpad Prism 軟件，測(cè)定每種細(xì)胞系的IC50值。測(cè)定IC50值直到IC50值穩(wěn)定（THP-1細(xì)胞需18天，所有其它細(xì)胞系需14天）。測(cè)評(píng)EPZ004777對(duì)轉(zhuǎn)化的小鼠造血祖細(xì)胞的作用效果，兩個(gè)獨(dú)立轉(zhuǎn)導(dǎo)各自病毒的細(xì)胞按每孔0.5-1×105個(gè)細(xì)胞接種在24孔板，孔中含1 ml 培養(yǎng)基，然后使用濃度高達(dá)30 mM EPZ004777處理。進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，每隔3-4天，在含新鮮化合物的新鮮培養(yǎng)基中再接種等量細(xì)胞數(shù)。MTT法檢測(cè)中，第10天，收獲成排再接種的細(xì)胞，然后按每孔 2×104各細(xì)胞一式三份接種在含適當(dāng)濃度EPZ004777的100 ml培養(yǎng)基中。細(xì)胞溫育2.5天，然后使用10 ml MTT試劑處理3小時(shí)，在100 ml MTT-增溶緩沖液 (來(lái)自Cell Proliferation Kit I [MTT])中裂解過(guò)夜

• 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)： Animal Models: 患MLL小鼠的移植瘤MV4-11模型 Dosages: 含100 和 150 mg/mL EPZ004777溶液的微型泵 Administration: 滲透泵

• 參考文獻(xiàn)：
  1. Daigle SR, et al. Selective killing of mixed lineage leukemia cells by a potent small-molecule DOT1L inhibitor. Cancer Cell. 2011, 20(1), 53-65. 2. Chen L, et al. Abrogation of MLL-AF10 and CALM-AF10-mediated transformation through genetic inactivation or pharmacological inhibition of the H3K79 methyltransferase Dot1l. Leukemia. 2013, 27(4), 813-822. 3. Deshpande AJ, et al. Leukemic transformation by the MLL-AF6 fusion oncogene requires the H3K79 methyltransferase Dot1l. Blood. 2013, 121(13), 2533-2541.

• 溶解性： Soluble  in  DMSO、Ethanol

• 保存條件： -20℃

• 配置溶液濃度參考：
  

  	1mg	5mg	10mg
  1 mM	1.853 ml	9.265 ml	18.53 ml
  5 mM	0.371 ml	1.853 ml	3.706 ml
  10 mM	0.185 ml	0.926 ml	1.853 ml
  50 mM	0.037 ml	0.185 ml	0.371 ml

• 注意：部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權(quán)威性，僅供客戶參考交流研究之用。

輸入產(chǎn)品批號(hào)：

本計(jì)算器可幫助您計(jì)算出特定溶液中溶質(zhì)的質(zhì)量、溶液濃度和體積之間的關(guān)系，公式為：

質(zhì)量 (mg) = 濃度 (mM) x 體積 (mL) x 分子摩爾量 (g/mol)

• pg ng μg mg g kg =
  fM pM nM μM mM M *
  nL μL mL L *